黄曲霉毒素B1检测卡原理及用途:黄曲霉毒素B1检测卡应用竞争抑制胶体金免疫层析的原理制成,用于检测谷物、饲料等样本中的黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)。
样本溶液滴入检测卡的加样孔后,样本溶液中的黄曲霉毒素B1与金标抗体相结合,从而阻止金标抗体与纤维素膜上黄曲霉毒素B1偶联物结合。当样本溶液中的黄曲霉毒素B1含量大于检测限时检测线不显色,结果为阳性;当样本溶液中黄曲霉毒素B1含量小于检测限时检测线显紫红色,结果为阴性。
2 技术指标
2.1 试剂卡灵敏度:2ppb(ng/ml)
对样本的最终检测限须以试剂卡灵敏度乘以样本处理的稀释比例。
2.2 样本检测下限:
谷物、饲料、粮油……………10ppb
谷物、饲料(须吹干)………5ppb
3 试剂盒组成
检测卡…………………………50个/盒
说明书…………………………1份
4 需要的器材和试剂
4.1 仪器:均质器 、振荡器、离心机、刻度移液管、天平(感量0.01g)
4.2 微量移液器:单道20µl-200µl,100µl-1000µl
4.3 试剂:甲醇,正己烷
5 样本前处理
5.1 样本处理前须知:
实验器具必须洁净并使用一次性吸头,以避免污染干扰实验结果。
5.2 配液:
配液1:样本提取液
70%甲醇,即V甲醇:V去离子水=7:3。
5.3 样本前处理步骤:
5.3.1 谷物、饲料
1)称取2g粉碎样本于离心管中,再根据不同的检出限要求按下表加入样本提取液
检测下限 |
10ppb |
20ppb |
50ppb |
100ppb |
样本提取液 |
2ml |
4ml |
10ml |
20ml |
振荡5分钟,室温4000转/分离心5分钟。
2)取0.1ml上清,加入0.4ml去离子水,混匀备用。
5.3.2谷物、饲料(须吹干)
若要求检测下限为5ppb时,可按如下操作:
1)称取2g粉碎样本于离心管中,加入4ml样本提取液,振荡5分钟,室温4000转/分离心5分钟;
2)取1ml上层液体在50-60℃条件下用氮气或空气吹干;
3)先加入0.25ml70%甲醇溶解剩下的残留物,剧烈震荡2分钟;再加入1ml去离子水,混匀备用。(注意:这一步甲醇与水的加液顺序不能颠倒)
稀释倍数:2.5倍 检测下限:5ppb
5.3.3粮油(菜油、麻油、色拉油、花生油等)
1)称取2g样本于离心管中,再根据不同的检出限要求按下表加入样本提取液
检测下限 |
10ppb |
20ppb |
40ppb |
100ppb |
样本提取液 |
2ml |
4ml |
8ml |
20ml |
然后加入8ml正己烷,振荡5分钟,室温4000转/分离心5分钟。
2)去除上层液体,取0.1ml下层液体加入0.4ml去离子水,混匀备用。
6 实验步骤
6.1 撕开检测卡铝箔包装袋,取出检测卡,放于平整、洁净的台面上。
6.2 用配套吸管吸取已准备好的样本液体,缓慢、逐滴的(应避免泡沫产生)滴加2-3滴(约60ul)到加样孔(S)内。
6.3 室温下放置8-10分钟判断结果。
7 结果判断
阴性:在检测窗内,检测线(T)及对照线(C)同时出现紫红色线。
阳性:在检测窗内,只有对照线(C)出现一条紫红色线。
失效:在检测窗内,对照线(C)不出现紫红色线。
8 注意事项
8.1 过期或铝箔袋破损的产品,均不可使用。
8.2 检测卡从冰箱中取出时应恢复到室温后打开,打开的检测卡应尽快使用以免受潮后失效。
8.3 不要触摸检测卡中央的白色膜面。
8.4 取液滴管不可混用,以免交叉污染。
8.5 待检样本溶液需清亮、无混浊颗粒、无细菌污染,否则容易导致阻塞、显色不明显等异常现象,从而影响实验结果的判定。
9 贮藏及保存期
储藏条件:试剂盒于2-30℃干燥环境下保存。
保 质 期:该产品有效期为1年,生产日期见包装盒。